Môi trường vi sinh Violet Red Bile Agar (VRBA).
Coliforms đề cập đến tất cả vi khuẩn hiếu khí, kỵ khí, gram âm, không sinh bào tử, có khả năng lên men đường lactose sinh khí và hình thành acid trong vòng 48h ở 35°C. Một trong các phương pháp để kiểm tra coliforms là sử dụng môi trường vi sinh Violet Red Bile Agar (VRBA).
Violet Red Bile Agar (VRBA) là môi trường chọn lọc xác định và định lượng các vi sinh vật coliform lên men đường lactose.
Thành phần môi trường Violet Red Bile Agar (VRBA).
Ingredients | Gms/liter |
Peptic digest of animal tissue | 7.000 |
Yeast extract | 3.000 |
Sodium chloride | 5.000 |
Bile salts mixture | 1.500 |
Lactose | 10.00 |
Neutral red | 0.030 |
Crystal violet | 0.002 |
Agar | 15.00 |
Nguyên lý môi trường Violet Red Bile Agar (VRBA)
Môi trường Violet Red Bile Agar (VRBA) dựa vào thành phần ức chế chọn lọc crystal violet, bile salts và hệ thống chỉ thị lactose và neutral red.
Crystal violet và bile salts ức chế sự phát triển của vi khuẩn gram dương.
Sự phân giải lactose thành acid được hiển thị bởi chất thỉ thị pH neutral red, chuyển môi trường ban đầu thành màu đỏ, cũng như sự kết tủa của acid mật.
Do đó, sự phát triển của nhiều sinh vật không mong muốn bị ức chế, trong khi xác định được vi sinh vật nghi ngờ.
Các vi sinh vật sử dụng lactose tạo khuẩn lạc màu tím và có quầng sáng bao quanh. Các vi sinh vật không lên men hoặc lên men chậm lactose tạo thành khuẩn lạc nhạt với các vùng màu xanh lá cây.
Peptic digest of animal tissue và yeast extract cung cấp nguồn carbon, nitrogen, vitamins và các chất dinh dưỡng cần thiết cho sự phát triển.
Lactose là nguồn lên men carbohydrate, sản sinh acid.
Chất chỉ thị Neutral red indicator giúp xác định acid được sinh ra.
Crystal violet và bile salts giúp ức chế nhóm gram dương và một số khác. Sodium chloride duy trì cân bằng thẩm thấu.
Kết quả trên môi trường Violet Red Bile Agar (VRBA
Organisms | Growth |
Enterobacter aerogenes | Mucoid, pink to pinkish-red |
Escherichia coli | Pinkish red with bile precipitate |
Salmonella Enteritidis | Colorless to orangish-yellow |
Salmonella typhimurium | Fair to good growth; colorless colonies |
Staphylococcus aureus | Partial to complete inhibition |
Sử dụng môi trường Violet Red Bile Agar (VRBA
Môi trường Violet Red Bile Agar (VRBA được sử dụng để phân lập, xác định và định lượng vi khuẩn họ Enterobacteriaceae trong nước, sữa và các sản phẩm thực phẩm từ sữa, cũng như là trong mẫu bệnh phẩm.