Môi trường vi sinh Eosin Methylene Blue EMB Agar
Eosin Methylene Blue (EMB) agar là môi trường vi sinh gây ức chế nhẹ sự phát triển của nhóm vi khuẩn gran dương và có chất chỉ thị màu các vi khuẩn lên men lactose như E.coli và không lên men lactose Salmonella, Shigella.
EMB agar được tạo ra bởi Holt-Harris và Teague, và được cải tiến bởi Levine. Do đó, trong công thức của môi trường EMB Agar có sự kết hợp của Levine với Holt-Harris và Teague, chứa peptic digest và phosphate.
Đây là môi trường nuôi cấy vi sinh quan trọng để phân biệt các vi sinh gây bệnh gram âm.
Thành phần môi trường vi sinh Eosin Methylene Blue EMB Agar
Ingredients | Gms/liter |
Peptic digest of animal tissue | 10.000 |
Dipotassium phosphate | 2.000 |
Lactose | 5.000 |
Sucrose | 5.000 |
Eosin – Y | 0.400 |
Methylene blue | 0.065 |
Agar | 13.500 |
Nguyên lý môi trường vi sinh Eosin Methylene Blue EMB Agar
EMB agar có sự kết hợp của 2 loại chất nhuộm eosin và methylene blue theo tỉ lệ 6:1
Vi khuẩn gram âm lên men lactose tạo acid làm giảm pH môi trường. Điều này dẫn đến chất nhuộm được khuẩn lạc vi khuẩn hấp thu và chuyển thành màu tím đen
Thêm vào đó, một số vi khuẩn lên men lactose tạo ra các khuẩn lạc phẳng, tối với ánh kim loại màu xanh lá cây.
Các vi sinh vật lên men lactose khác tạo ra các khuẩn lạc nhầy lớn hơn, thường chỉ có màu tím ở trung tâm khuẩn lạc.
Trong môi trường thạch EMB, hầu hết khuẩn lạc của các chủng E. coli đều có ánh xanh đặc trưng.
Vi khuẩn không lên men lactose, mặt khác, có thể làm tăng pH do khử amin của protein. Quá trình này thuốc nhuộm không được hấp thụ, nên khuẩn lạc không có màu.
Peptic digest là nguồn carbon, nitrogen, và cung cấp các dưỡng chất thiết yếu khác.
Lactose và sucrose là nguồn cung cấp nâng lượng cho quá trình lên men
Eosin-Y và methylene blue là chất chỉ thị màu. Phosphate là chất đệm cho môi trường.
Kết quả trên môi trường vi sinh Eosin Methylene Blue EMB Agar
Organisms | Growth |
Escherichia coli | Blue-black bull’s eye; may have a green metallic sheen |
Pseudomonas aeruginosa | Colorless |
Enterobacter aerogenes | Good growth; pink, without sheen |
Klebsiella pneumoniae | Pink, mucoid colonies |
Proteus mirabilis | Luxuriant growth; colorless colonies |
Salmonella Typhimurium | Luxuriant growth; colorless colonies |
Sử dụng môi trường vi sinh Eosin Methylene Blue EMB Agar
- EMB Agar (Eosin Methylene Blue Agar) được khuyến nghị sử dụng để phân lập và phân biệt vi khuẩn đường ruột gram âm.
- EMB Agar hữu ích trong phân biệt vi khuẩn gram âm và gram dương.
- EMB Agar được sử dụng để kiểm tra chất lượng nước, đặc biệt kiểm tra xem nước có bị nhiễm các vi sinh vật có hại
- Nó phân biệt các vi sinh vật trong nhóm đại tràng, thương hàn, kiết lỵ
- Môi trường EMB hỗ trợ phân biệt Escherichia coli, vi sinh bật đường ruột không gây bệnh lên men lactose, Salmonella và Shigella