Môi trường MacConkey Agar

Môi trường MacConkey Agar

 MacConkey agar là công thức môi trường đầu tiên được phát triển ở thế kỷ 20 bởi Alfred Theodore MacConkey. MacConkey Agar là môi trường chọn lọc và chuyên biệt sớm nhất được sử dụng để nuôi cấy coliform. Nó được sử dụngđể phân lập và phân biệt vi khuẩn gram âm, đặc biệt là họ EnterobacteriaceaePneudomonas.

Thành phần môi trường MacConkey agar 

Ingredients Amount
Peptone (Pancreatic digest of gelatin)  17 gm
Proteose peptone (meat and casein)  3 gm
Lactose monohydrate  10 gm
Bile salts  1.5 gm
Sodium chloride  5 gm
Neutral red  0.03 gm
Crystal Violet  0.001 gm
Agar  13.5 gm

 

Nguyên lý môi trường MacConkey Agar 

Pancreatic digest of gelatin và peptones (meat and casein) cung cấp dưỡng chất vitamin và nhân tố nitơ cần thiết cho sự phát triển của vi sinh vật.

Lactose monohydrate là nguồn carbohydrates cần thiết cho sự lên men.

Crystal violet và bile salts là nhân tố chọn lọc, ức chế hầu hết các loài vi khuẩn gram dương.

NaCl duy trì nồng độ thẩm thấu trong môi trường.

Các chủng lên men Lactose tạo màu đỏ hoặc hồng. Màu đỏ là do quá trình sản sinh acid từ lên men lactose. Màu đỏ được tạo ra do sự sản xuất axit từ lactose, hấp thụ đỏ trung tính (neutral red), và sau đó sự thay đổi màu sắc của chất nhuộm khi pH của môi trường giảm xuống dưới 6.8.

Vi khuẩn không lên men lactose như Salmonella, Proteus, Pseudomonas aeruginosa, Shigella

không thể sử dụng lactose, thay vào đó sẽ sử dụng peptone. Việc này sẽ hình thành ammonia, làm tăng độ pH của môi trường, và hình thành khuẩn lạc màu trắng hoặc không màu. Những khuẩn lạc này có thể có màu vàng tới nâu với tâm đen.

Lactose có thể được thay thế trong môi trường bởi các loại đường khác và sự thay thế này có thế được sử dụng để kiểm tra khả năng lên men của vi khuẩn gram âm đối với loại đường thay thế đó.  Ví dụ, sorbitol có thể được sử dụng thay thế đường trong môi trường MacConkey agar để hỗ trợ phân lập và phân biệt nhóm vi khuẩn gây bệnh đường ruột E. coli serotypes như là E. coli O157:H7, biểu hiện là khuẩn lạc tròn trắng do không lên men sorbitol.

 

Kết quả trên môi trường MacConkey agar 

Organisms Growth results
Escherichia coli Pink to rose-red colonies (may be surrounded by a zone of precipitated bile)
Enterobacter, Klebsiella Mucoid, pink colonies
Proteus Colorless colonies, swarming growth
Salmonella, Shigella Colorless colonies, or sometimes medium color:  orange to amber
Pseudomonas Irregular, colorless to pink colonies

Result Interpretation on MacConkey Agar

Sử dụng môi trường MacConkey agar 

  • MacConkey Agar sử dụng để phân lập vi khuẩn đường ruột gram âm
  • MacConkey Agar sử dụng để phân biệt vi khuẩn lên men lactose với vi khuẩn gram âm không lên men lactose.
  • MacConkey Agar được sử dụng trong kiểm nghiệm vi sinh thực phẩm hoặc kiểm tra coliform trong mẫu nước.
  • MacConkey Agar sử dụng để kiểm tra sữa và các sản phẩm từ sữa.
  • British pharmacopoeia khuyến nghị sử dụng môi trường này cho cấy chuyển và xác định Escherichia coli.

 

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *